Главная > Препараты > Провокационные тесты в аллергологии. Специфические и неспецифические методы обследования больных аллергией Аллергологический метод исследования


Провокационные тесты в аллергологии. Специфические и неспецифические методы обследования больных аллергией Аллергологический метод исследования




7039 0

Эти методы могут широко использоваться при аллергических заболеваниях в фазе обострения, в периоды массивного контакта с аллергеном, при высокой чувствительности заболевших к аллергену, при наличии противопоказаний, у детей, при идентификации профессиональных аллергических заболеваний, так как исключают возможность появления неспецифических, ложноаллергических реакций.

Среди различных способов специфической аллергодиагностики при реагиновом IgE-зависимом типе более предпочтительно определение моноклональных IgE.

Существуют непрямые методы определения IgE и наиболее распространенные прямые методы выявления специфических IgE, основанные на новых технологиях и использовании диагностикумов в виде стандартизованных и сертифицированных аллергенов к ним.

Реакция пассивного переноса по Праустнитцу—Кюстнеру (непрямой метод постановки кожной пробы) чаще используется в детской практике при идентификации пищевой аллергии. Сущность метода заключается в реакции пассивного переноса реципиенту сенсибилизации с помощью внутрикожного введения 0,1 мл сыворотки крови больного с наличием в ней предполагаемых специфических IgE. Спустя 24 ч в этот же участок вводят 0,02 мл предполагаемого аллергена. Реакцию регистрируют через 20 мин. Однако угроза переноса СПИДа, вирусного гепатита и других инфекций не позволяет широко использовать данный метод.

Определение специфических IgE

Исследование общего IgE осуществляется с помощью бумажного радиоиммуносорбент-ного теста (метод PRIST), определение аллергоспецифического IgE — радиоаллергосорбентного теста (метод RAST). Наряду с ними в настоящее время для определения аллергоспецифичес-ких IgE все шире используется способ иммуноферментного анализа (ИФА).

Метод RAST наиболее специфичен и точен, так как основан на использовании радиоактивной метки. Сущность его заключается в связи специфического IgE исследуемой сыворотки с аллергеном, размешенным на бумажной пластинке. После отмывания неспецифического (общего) IgE в содержимое добавляются меченые 125I антитела против IgE. Образовавшийся радиоактивный комплекс считывается на сцинтилляционном счетчике.

Метод ИФА

Сыворотка обследуемого, содержащая специфические IgE, наслаивается на полистирольную поверхность микропланшет с адсорбированным набором аллергенов, с которыми связываются только определенные специфические IgE.

При точечном иммуноанализе аллергены наносятся в виде точек на нитроцеллюлозные диски.

Для определения концентрации специфических IgE, связанных с аллергеном, добавляются антиантитела (меченные ферментом) к IgE. На следующем этапе с помощью специальных реагентов, воспроизводящих цветную реакцию, интенсивность которой зависит от концентрации специфических lgЕ в комплексе с аллергеном, определяют содержание специфических lgЕ фотометрически в вертикальном луче в системе «Унискан» или «Мультискан». В норме она не превышает 210 МЕ/ед.

Наряду с выявлением специфических lgЕ используются и другие лабораторные тесты для диагностики как антителозависимых реакций (определение показателей специфического повреждения базофилов, аллергических антител в реакции пассивной гемагглютинации, реакция связывания комплемента и др.), так и реакций замедленного (клеточного) типа (реакция торможения миграции лейкоцитов крови — РТМЛ, тест розеткообразующих клеток — РОК, тест повреждения нейтрофилов и др.).

Их применение в аллергологической практике не потеряло своего значения — идентификация повышенной чувствительности к аллергенам, аутоантигенам позволяет осуществлять более целенаправленное лечение и реабилитацию больных.

Реакция прямого специфического повреждения базофилов крови

Базофилы крови, тучные клетки — клетки-мишени в реализации аллергических реакций немедленного типа. lgЕ с помощью Fс-фрагмента фиксируются на рецепторах мембран этих клеток, а с помощью Fаb-фрагмента специфически реагируют с аллергеном. Это сопровождается резкой активацией (дегрануляцией) клеток-мишеней, что и используется в качестве маркера аллергической реакции.

Для постановки реакции 5 мл исследуемой крови добавляют в центрифужную пробирку с 5 каплями 6 % водного раствора трилона Б и инкубируют в течение часа при 37 °С. Образовавшуюся взвесь лейкоцитов с помощью пастеровской пипетки переносят в чистую пробирку, а затем разливают в две центрифужные пробирки по 0,3 мл. В первую пробирку (опытную) добавляют 0,1 мл изотонического раствора хлорида натрия, в котором растворена рабочая доза аллергена, во вторую (контрольную) — 0,1 мл изотонического раствора хлорида натрия без аллергена.

Обе пробирки инкубируют в течение 10 мин при 37 °С, затем центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин. После чего сливают надосадочную жидкость, а лейкоцитарную массу, оставшуюся на дне пробирки, осторожно встряхивая, разбивают в остатке жидкости, стекающей со стенок. С помощью пастеровской пипетки содержимое каждой пробирки переносят на отдельные предметные стекла (в виде капли на край) и шлифованным краем другого стекла готовят тонкие лейкоцитарные мазки.

Мазки окрашивают эозин-метиленовым синим по Май—Грюнвальду в течение 1—2 мин после просушивания на воздухе. После промывания препарата в метиловом спирте мазки-препараты микроскопируют с иммерсией (увеличение 10 х 80). Просчитывают 50 базофилов по краям мазка и число поврежденных средних клеток. Показатель поврежденных клеток в опытном и контрольных препаратах определяют по формуле:


Реакция считается положительной при показателе 1,4 и выше.

Л.А. Дуева с соавт. (1986) подобрали рабочие концентрации и дозы химических аллергенов и антибиотиков для реакции прямого специфического повреждения базофилов крови (табл. 4).

Таблца 4. Рабочие концентрации и дозы реагентов для РСПБ

Тест деструкции тучных клеток

Для получения взвеси тучных клеток вводят внутрибрюшинно крысе 8—10 мл (мыши — 2—5 мл) подогретого до 37 °С изотонического раствора хлористого натрия, приготовленного на 0,15 моль фосфатном буфере с рН 7,2, слегка массируют живот. Суспензию тучных клеток отмывают изотоническим раствором хлористого натрия, затем центрифугируют при 500 об/мин.

Суспензию тучных клеток (0,02 мл) и сыворотку больного (0,02 мл) инкубируют 15 мин при 37 °С, затем вносят 0,02 мл аллергена в предварительно подобранной концентрации и снова инкубируют 15 мин при 37 °С. Одномоментно готовят три контроля: тучные клетки без сыворотки и без аллергена; тучные клетки с сывороткой без аллергена; тучные клетки с аллергеном без сыворотки.

После окраски образцов 0,025 % раствором толуидинового синего или 0,3 % раствором нейтральной краски заполняют суспензией тучных клеток камеры Горяева и подсчитывают окрашенные клетки, сравнивая число гранулированных клеток в контроле и опыте. Наблюдаемая дегрануляция тучных клеток в испытуемом образце считается слабоположительной при наличии 10—20 % дегрануляции, положительной — при 21—40 %, резкоположительной — при дегрануляции более 40 % клеток по сравнению с контролем.

Концентрация аллергенов, не вызывающая спонтанной дегрануляции, для антибиотиков — 100—1000 ЕД/мл, калия бихромата и йодида, натрия хромата, никеля сульфата — 0,01—0,1 % раствора, формальдегида — 0,2—0,4 %. Бытовые аллергены используются в дозе от 10 до 100 PNU.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) позволяет обнаруживать антитела к водорастворимым и водонерастворимым аллергенам.

Реакция основана на феномене агглютинации эритроцитов, сенсибилизированных in vitro к химическим аллергенам, при добавлении сыворотки пациента, содержащей антигаптенные антитела.

Реакция торможения миграции лейкоцитов крови (РТМЛ) основана на способности сенсибилизированных Т-лимфоцитов (например, к гаптенам) выделять лимфокин — фактор, ингибирующий миграцию лейкоцитов. С помощью РТМЛ раскрывается реакция клеточного типа (неантителозависимая) к различным антигенам.

Всем больным, страдающим атопическим дерматитом, должно быть как можно раньше проведено аллергологическое обследование, которое практически не имеет противопоказаний, за исключением обострения основного или других заболеваний. Диагностику следует проводить также в случае наличия у пациента других «аллергосимптомов» (эпизоды персистирующего кашля, в том числе ночью, после физической нагрузки; зуд и отек глаз и/или заложенность носа, насморк и т. п.). Аллергологическое обследование является обязательным для тех больных, которым предполагается назначить профилактическое лечение (специфическую иммунотерапию/аллерговакцинацию).

В целом аллергодиагностика имеет неоценимо важное значение с целью:
а) ранней идентификации детей из группы риска развития аллергических заболеваний;
б) назначения больному специфической терапии, в том числе элиминационной, соответствующей фармакотерапии, специфической иммунотерапии (аллерговакцинации).

У детей объем аллергологического обследования зависит от их возраста, семейной отягощенности атопией, провоцирующих факторов, симптомов заболевания и т.

п. История болезни включает данные о наследственной предрасположенности к аллергическим заболеваниям, погрешностях в питании беременной/кормящей матери, профессиональных вредностях у родителей, сроках введения прикорма и реакций на новый вид пищи у ребенка. Врач тщательно анализирует частоту и тяжесть симптомов заболевания, факторы окружающей среды (жилищно-бытовые условия, наличие животных, птиц, рыб в квартире, курение и т. д.), уточняет связь клинических проявлений с определенным сезоном года, местом пребывания ребенка (школа, вне дома); выявляет другие сопутствующие атопические заболевания (пищевая аллергия, аллергический ринит/конъюнктивит, бронхиальная астма). Особое внимание обращают на специфический аллергологический анамнез, который необходимо использовать для дальнейшей коррекции противоаллергической терапии, а также на аллергологический анамнез тех больных, у которых были выявлены позитивные кожные пробы. Врачи могут пользоваться также стандартным аллергологическим опросником.

Атопию (или IgE-сенсибилизацию) устанавливают на основании клинических симптомов заболевания и положительных кожных проб или повышенного уровня общего или специфических IgE-антител в сыворотке крови больного.

При назначении детям, страдающим атопическим дерматитом, кожных проб необходимо учитывать следующее:
в случае обострения заболевания и при локальном применении наружных кортикостероидов применение кожных проб ограничено;
следует отменить прием антигистаминных препаратов за 3 дня до постановки кожных тестов;
рекомендуется постановка кожных проб с использованием прик-метода. По мнению зарубежных исследователей, считается ошибочной рекомендация ограничить их постановку у детей до 3 лет. Результаты прик-тестов в значительной степени зависят от используемого экстракта и давления ланцета на кожу;
атопия считается доказанной при наличии хотя бы одной положительной пробы (средний диаметр папулы > Змм при негативном контроле) или > 2 баллов при серологическом обследовании.

По положительным результатам аллергологического обследования можно говорить лишь о том, что индивид сенсибилизирован. Эти данные приобретают высокую диагностическую значимость только при сопоставлении с историей болезни и клиническими симптомами. Сравнительный анализ чаще всего подтверждает наличие у больных атопией строгой корреляции между высоким уровнем специфических IgE-антител сыворотки крови и клиникой заболевания. Применительно к атопическому дерматиту результаты кожного аллергологического обследования зависят от возраста ребенка, используемых методов диагностики и степени тяжести заболевания.

У детей в возрасте до 3-4 лет одним из основных провоцирующих факторов развития атопического дераматита считается пищевая аллергия. В раннем возрасте чаще всего она проявляется кожными и гастроинтестинальными симптомами, крайне редко - респираторными. Основная причина пищевой гиперчувствительности - аллергия на белки коровьего молока, яиц, злаки и орехи. Дети с дермо-респираторным синдромом могут быть сенсибилизированы к ингаляционным аллергенам, и их необходимо обследовать на пылевые клещи, шерсть кошки (чаще всего).

С возрастом повышается сенсибилизация к ингаляционным аллергенам (клещи домашней пыли, аллергены животных, тараканы), позже - к внежилищным аллергенам (грибки, пыльца). Как правило, высокую частоту сенсибилизации выявляют у детей с атопической астмой и аллергическим ринитом/конъюнктивитом. Однако наболее высокий уровень сывороточного IgE отмечается у больных атопическим дерматитом по сравнению с поллинозом или бронхиальной астмой.

Типичный сезонный ринит и/или конъюнктивит (весной, летом) можно диагностировать без аллергологического обследования только на основании анамнеза больного. В дальнейшем таким пациентам обязательно проводят аллергологическое обследование с целью уточнения причинно-значимых аллергенов и назначения специфической иммунотерапии.

Аллергические заболевания – группа заболеваний, характеризующихся комплексом патофизиологических процессов, ключевым звеном которых является избыточная сенсибилизация иммунной системы к определенным этиологическим факторам (аллергенам). У больного с аллергическим заболеванием при первичном контакте с аллергеном происходит образование специфических антител или специфически реагирующих Т-лимфоцитов. При повторном контакте развивается реакция гиперчувствительности, тип которой определяется видом аллергена, локализацией проникновения аллергена в организме, а также рядом внутренних и внешних факторов.

Лабораторная диагностика аллергических заболеваний становится все более важной составляющей комплексного обследования, проводимого врачом-аллергологом. Важным преимуществом такой диагностики аллергических заболеваний является о, что она, в отличие от кожных аллергопроб, практически не имеет противопоказаний к проведению исследования. Взятие крови для анализа безопасно и может быть проведено у людей любого возраста и состояния, в т. ч. у грудных детей и беременных женщин. Лабораторные исследования можно выполнять и в период повышенной сенсибилизации или обострения заболевания, проводить на фоне лечения. В ряде случаев (элиминация конкретного аллергена, анти-IgE терапия) мониторинг лечения проводят при помощи соответствующих лабораторных исследований.

Увеличению роли лабораторной диагностики в аллергологии способствуют объективные причины, связанные со значительным ростом числа аллергических заболеваний и их распространенности. Существенно увеличилось и число аллергенов, которые способны привести к тяжелым клиническим последствиям, в т. ч. новых аллергенов искусственного происхождения. В таких условиях возникает потребность скринингового обследования большого числа людей с подозрением на аллергические заболевания.

Аллергены, вызывающие патологическую иммунную реакцию у пациента, называют причинно-значимыми или причинными аллергенами. Моноаллергенами называют выделенные из причинно-значимого аллергена отдельные вещества (белки, полисахариды, гликопротеиды, металлопротеиды), к эпитопам которых вырабатываются специфические антитела или рецепторы лимфоцитов. Моноаллергены играют большую роль в современной аллергологии, так как в одном причинно-значимом аллергене может содержаться целый комплекс потенциальных моноаллергенных компонентов, но только один или несколько из них будут реальными этиологическими агентами аллергических реакций у конкретного пациента. Для определения специфических антител в наборах реагентов нового поколения используются препараты подобных аллергенов, полученные по технологиям высокой очистки экстракта природного источника или созданные путем биотехнологических процессов. Разработанные новые технологии позволяют провести анализ для выявления сразу большого числа аллергенов одновременно, выполнить скрининговое обследование без подробного выяснения анамнеза. В арсенале многих производителей наборов реагентов для аллергодиагностики тысячи аллергенов, к которым можно определять специфические антитела.

В лабораторной диагностике аллергических заболеваний определяют преимущественно уровень общих IgE-антител и специфических IgE- и IgG4-антител в сыворотке крови к отдельным аллергенам или группам аллергенов природного или искусственного происхождения. IgE-зависимая реакция возникает в течение нескольких минут после контакта с аллергеном, а IgG (IgG4)-зависимая (наиболее часто встречаемая при пищевой аллергии) развивается в более поздние сроки – через часы, иногда даже через несколько суток после контакта с аллергеном.

Показания к исследованию

  • Скрининг аллергических заболеваний;
  • развернутое обследование в срочных клинических случаях;
  • выбор адекватной терапии и контроль тактики ведения пациента;

Методы исследования: Для определения антител (общий IgE, специфические IgE, IgG, IgG4) используют различные иммунохимические методы исследования.

Общий IgE

В норме концентрация суммарных (общих) IgE-антител очень мала и не превышает 0,05% по сравнению с концентрацией IgG-антител. Общее количество IgE-антител начинает возрастать у ребенка после рождения и продолжает расти до 10–14 лет, после чего у здоровых людей стабилизируется на постоянном уровне и снижается после 60 лет. Повышение уровня концентрации общего IgE в крови наблюдается преимущественно при аллергических заболеваниях, развивающихся по механизму реакций гиперчувствительности I типа (атопические заболевания). В большинстве случаев повышение концентрации общих IgE выше 100 U/л у взрослых людей и более 20 U/л у детей до 4 лет может свидетельствовать об аллергическом заболевании.

Определение специфических IgE выполняют при наличии IgE-зависимой пищевой аллергии, а также при невозможности проведения кожных проб, в т. ч. у детей и лиц пожилого возраста, у пациентов с заболеваниями кожи, аллергическими реакциями в анамнезе и др. Интерпретация результатов исследования требует осторожности, заключение должно быть сделано врачом-аллергологом с учетом анамнеза и клинической картины заболевания.

Специфические IgG

В последние годы внимание аллергологов привлекает IgE-независимая пищевая аллергия, иммунопатогенез которой связан с выработкой различных подклассов IgG антител, участвующих в иммунопатологических реакциях с хроническими воспалительными заболеваниями и “скрытыми” формами пищевой аллергии. Для диагностики скрытой пищевой аллергии используют количественное определение подклассов IgG специфических антител (IgG1-IgG4) к индивидуальным антигенам пищевых продуктов. Как и при интерпретации результатов выявления общего и специфических IgE, заключение должно быть сделано врачом-аллергологом с учетом анамнеза и клинической картины заболевания.

АЛЛЕРГОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Удельный вес аллергических заболеваний в патологии человека неуклонно возрастает. Важную роль в их диагностике отводят анамнезу клиническим исследованиям больного. Haряду с этим все шире начинает применяться постановка аллергических проб с бактериальными и небактериальными аллергенами. Выбор метода кожного тестирования зависит от типа повышенной чувствительности, вида аллергена, степени сенсибилизации, возраста.

Среди экзогенных неинфекционных аллергенов особое значение в практике стоматолога имеют медикаменты. Очень часто отмечается повышенная чувствительность к антибиотикам. Воздействие этих аллергенов вызывает, как правило, реакцию немедленного типа. Для диагностики лекарственной аллергии в некоторых клиниках применяют кожные пробы. Кожные пробы с лекарствами (особенно с антибиотиками) следует проводить осторожно, так как у больных с гиперсенсибилизацией может развиться тяжелая реакция - анафилактический шок. Начинать надо с малочувствительной капельной пробы. При получении отрицательной капельной пробы затем проводят скарификационную, аппликационную и внутрикожную. Если скарификационная кожная проба дает положительный результат, то дальнейшее исследование прекращают.

Методика капельных кожных проб. Кожу сгибательной поверхности предплечья протирают спиртом или смесью спирта с эфиром. Капли испытуемого лекарства и контрольного раствора наносят на расстоянии 5 см. При повышенной чувствительности через несколько минут на месте нанесения лекарства появляются зуд, отечность, гиперемия.

Методика скарификационных кожных проб. На обработанную спиртом кожу предплечья наносят капли медикамента и контрольной жидкости (растворитель, изотонический раствор хлорида натрия). Оспопрививательным скальпелем делают линейные надрезы (по 5 мм) в месте нанесения капель (не допускать появления крови). Выдерживают несколько минут и ватными тампонами удаляют остатки раствора, после чего учитывают немедленные (через 15-20 мин) и замедленные (через 24 ч) кожные реакции. Появление папулы (до 3 мм и более), а также гиперемии, везикулезных высыпаний, реакции со стороны регионарных лимфатических узлов расценивается как положительная реакция. На контрольном участке предплечья видна только полоска.

Методика аппликационных кожных проб. Сложенную в четыре слоя марлю (2 х 2 см) пропитывают раствором испытуемого вещества в концентрации, не вызывающей в норме раздражения кожи. На обезжиренную сухую кожу (обычно предплечья) накладывают эту марлю, а рядом при точно таких же условиях - марлю, пропитанную растворителем. Каждый участок накрывают сверху целлофаном и фиксируют пластырем. Результаты проб учитывают через 24-48 ч. Положительная реакция характеризуется появлением дерматита. Недостаток такой пробы - возможное отсутствие реакции кожи при повышенной чувствительности слизистой оболочки рта.

Методика внутрикожной пробы. Внутрикожные пробы в стоматологической практике применяются в основном для выявления сенсибилизации к бактериальным аллергенам. Наиболее часто при этом используются аллергены гемолитического стрептококка, гемолитического стафилококка, кишечной палочки, вульгарного протея, которые получают в готовом виде. Внутреннюю поверхность предплечья обрабатывают спиртом и эфиром. Короткой тонкой иглой внутрикожно вводят 0,1 мл аллергена, содержащего 4 кожные дозы. Кожно-аллергические реакции учитываются через 24-48 ч. При положительной реакции через 24 ч на месте введения аллергена возникают гиперемия и инфильтрат. Величина реакции расценивается следующим образом: резкоположительная реакция (+ + + +)-гиперемия, инфильтрат диаметром не менее 30 мм, болезненность при пальпации; положительная реакция (+ + +)-размер очага 21-29 мм и менее выраженная болезненность; слабоположительная реакция (+ +)-очаг размером 15-20 мм со слабым отеком; сомнительная реакция (+) -очаг размером 10-15 мм. При резко-положительной или положительной реакции на один аллерген у больного признается моноаллергия к данному аллергену, на два или более - полиаллергия. Повторное внутрикожное введение бактериальных аллергенов не рекомендуется проводить чаще 1 раза в месяц.

Безопасны методы диагностики аллергических состояний, проводимые вне организма (in vitro). Наиболее распространенными являются реакции лейкоцитолиза и лейкергии, базофильный тест, показатель повреждаемости нейтрофилов.

Реакция лейкоцитолиза основана на выявлении деформирующего действия бактериальных аллергенов на лейкоциты периферической крови. Специфический аллерген деформирует и разрушает 14% и больше нейтрофилов, неспецифическая деформация (контроль) не превышает 10%. Интенсивность кожных реакций и процент деформации нейтрофилов в реакции лейкоцитолиза находятся в прямой зависимости (60-80). Деформация более 35% нейтрофилов соответствует резкоположи-тельной реакции при кожной пробе, 25-34% - положительной реакции.

Аллергия - довольно распространенное состояние. Съев апельсин, погладив кошку, попав в пыльное помещение, получив укус пчелы, люди начинают чихать и чувствовать зуд в глазах, раздражение кожи, расстройство пищеварения. А ведь мало кто знает, что аллергия - критическое состояние, и иногда может привести к отеку верхних дыхательных путей, заканчивающемуся летальным исходом. Во многих случаях это можно избежать, если проводить раннюю диагностику заболевания.

Что такое аллергия?

Аллергией называют усиленную чувствительность организма к некоторым веществам, выражающуюся патологической реакцией. Смысл состояния заключается в следующем. Некоторые вещества являются аллергенами для иммунной системы человека. При первой встрече защитная система как бы «запоминает» их, а при повторной встрече выделяет большое количество биологически активных веществ (гистамин, лейкотриены, простогландины), вызывающих повреждение тканей организма и нарушение их функционирования. Это так называемая патофизиологическая стадия аллергии. Она может закончиться отеком Квинке и смертью человека от удушения, все это может развиваться в течение всего лишь несколько минут.

Особое значение в развитии аллергической реакции имеют иммуноглобулины класса Е . Именно они реагируют при повторной встрече с аллергенами и фиксируются вместе с ними на поверхности мембран базофилов и тучных клеток, вызывая освобождение БАВ.

Существуют разные группы аллергенов:

  • Пищевые продукты.
  • Продукты жизнедеятельности животных и растений.
  • Лекарства.
  • Бытовые (самое извсетное - пыль).
  • Вещества, попадающие в организм при непосредственном контакте с насекомыми.
  • Химико-промышленные соединения.

Диагностика аллергии важна, поскольку позволяет выявить гиперчувствительность организма к тому или иному продукту или животному или растению до проявления патологии и избежать повторной встречи.

Методы диагностики аллергии

К основным мероприятиям, позволяющим определить повышенную реактивность человека, относятся:

  1. Кожные пробы.
  2. Анализ на содержание иммуноглобулинов Е в крови.
  3. Провокационные тесты.
  4. Элиминационные тесты.

Кроме того, следует помнить о противопоказаниях к проведению анализов. Это:

  • Детский возраст до пяти лет.
  • Возраст после 60 лет.
  • Противопоказано для беременных или женщин, кормящих грудью.
  • При обострении патологий других систем органов.
  • Нельзя проводить пациентам, принимающим гормоны в качестве терапии.
  • Нельзя, если в истории болезни указан хоть один случай анафилактического шока.

Рассмотрим каждую из диагностик подробнее.

Кожные пробы

Их проводят с целью выявления, есть ли у человека чувствительность на определенное вещество. Пробы можно ставить несколькими способами:

  • Метод скарификации . Очищенное и подготовленное предплечье пациента размечают на «ячейки» или квадраты. На каждый участок наносят каплю аллергена, после чего через нее делают царапину. Метод, как и последующие, бескровный и абсолютно безболезненный.
  • Аппликационные пробы . Кожу при этом виде не царапают, а просто прикладывают смоченные в растворе ватные тампоны.
  • Прик-тест . Общий смысл тот же, что и в скарификационном, только производят не царапины, а уколы с помощью специальной иглы.
  • Введение под кожу растворов аллергенов.

За один подход можно определять не более 15 компонентов. Существует огромное количество препаратов, сделанных из шерсти домашних животных, перьев птиц, пыльцы растений, пыли, микроскопических грибов, пищевых продуктов и химических соединений.

Положительной реакция считается в том случае, если в месте нанесения отмечается покраснение, зуд или небольшой отек кожи.

Пациента проверяют обычно через 24-48 часов, но иногда чувствительность может проявляться уже через 15-30 минут.

Результат анализа выдается в виде списка, где указано на какие из аллергенов есть положительная реакция, причем есть разные степени её выраженности: сильная, слабая, сомнительная, отрицательная.

Анализ на Ig E в крови

В норме иммуноглобулины класса Е обнаруживаются в крови в незначительных количествах. Однако повышение уровня этих тел может говорить о наличии таких заболеваний, как: аллергический ринит, крапивница, системная анафилаксия. Метод очень информативный, однако действует только в случае IgE-зависимых аллергий, к счастью это самый распространенный тип аллергий. Кроме того, повышение этого класса иммуноглобулинов свидетельствует не только о чувствительности, но и о гельминтозах и бронхиальной астме.

Анализ Ig E эффективен больше у детей. Одно только повышение этих соединений не является 100-процентной гарантией наличия аллергии, нужно выявить аллерген-специфический антиген, который может быть ответственен за реакцию чувствительности.

Есть у метода и несомненные преимущества: его можно проводить и при обострении заболеваний других органов, он е противопоказан маленьким детям, пожилым людям, беременным и кормящим матерям.

В ходе пробы берут кровь из вены спустя 3 часа после последнего приема пищи.

Провокационные тесты

Иногда, когда результаты кожных проб не совпадают с симптоматикой, или картина слишком смазана, то назначают провокационные тесты. При этом методе небольшое количество аллергена вводят человеку непосредственно в легкие при помощи ингаляций или на слизистую оболочку носовой полости или под язык, на конъюнктиву. Реакция считается положительной, если наблюдаются покраснение и зуд (в случае глаз), чихание и ринит (в случае носовой полости).

Элиминационные тесты

Чаще всего применяется при диагностике пищевой аллергии. Если предполагается, что какой-то продукт вызывает аллергию, то проводят его элиминацию, то есть удаление из рациона . Если симптомы аллергии исчезли, то можно с уверенностью сказать, что аллерген выявлен.

При проведении любого вида диагностики аллергии важно прекратить заранее прием любых противоаллергических и противогистаминных препаратов. Кроме того, следует помнить о противопоказаниях к проведению анализов. Это:

Чаще всего применяются все методы, то есть используют комплексную диагностику. Одним из её важных моментов является ведение дневника врачом-аллергологом, в котором отмечается время начала аллергической реакции, ее продолжительность, характерные проявления. С помощью дневника можно установить сезонный характер чувствительности, например, по причине пыльцы какого-нибудь растения, а также разработать профилактические меры, например, избегать нахождения вблизи аллергенного объекта.

Таким образом, диагностика аллергии - распространенная, безболезненная, и, в большинстве случаев, безопасная процедура, позволяющая выявить аллерген и подтвердить наличие чувствительности. С помощью комплексных анализов можно выбрать стратегию лечения и профилактики, позволяющей избежать опасной патологии в будущем.

Специфические и неспецифические методы обследования больных аллергией

В статье перечислены применяемые современной медициной методы диагностики аллергии.

Физикальное обследование

Включает осмотр пациента, пальпацию, аускультацию (прослушивание звуков, сопровождающих работу органов) и перкуссию (прослушивание звуков при простукивании определённых участков на теле пациента).

Лабораторная диагностика аллергии

Лабораторный метод диагностики аллергии определяет состояние организма по взятым у пациента анализам. Большинство методов базируется на ИФА (иммуноферментный анализ) - специфической реакции антиген-антитело. На ИФА основаны метод множественной хемилюминисценции и иммунофлуоресцентный метод на аппарате ImmunoCAP.

Биохимический анализ крови

Изучает состояние внутренних органов и систем, наличие воспалительных процессов, определяя химический состав крови.

Скрининговое аллергологическое обследование

Объект исследования - сыворотка крови. Проводятся ИФА тесты на основные группы аллергенов. Метод позволяет сузить круг поиска виновного аллергена.

Определение специфических IgG

Объект - сыворотка крови. LgG-тест ИФА проводят с индивидуальными антигенами для точного выявления виновного аллергена.

Показания: диагностика пищевой аллергии и непереносимости.

  • 50 Ед/мл - результат отрицательный;
  • 50 - 100 Ед/мл - слабое нарушение толерантности;
  • 100 - 200 Ед/мл - умеренное нарушение толерантности;
  • более 200 Ед/мл - выраженное нарушение толерантности.

Исследование специфических антител IgE

IgE антитела отвечают за реакции немедленного типа. Определяются в сыворотке крови методом ИФА. Выявляется вызывающий аллергию агент.

Показания: невозможность выявить аллерген через анамнез, отказ от кожных проб, системные реакции в анамнезе, дерматит, гипо- и гиперреактивность кожи, количественная оценка антител, lgE-зависимая пищевая аллергия.

Забор крови производится из локтевой вены. За несколько дней до сдачи крови исключают аллергенные продукты из диеты и контакт с животными, прекращают приём антигистаминных препаратов. Анализ проводится в период ремиссии, кровь берут натощак..

Нормальное (референсное) значение lgE в крови - менее 0,35 МЕ/мл

При выявлении lgE-зависимой аллергии показана аллерген-специфическая иммунотерапия

Исследование газового состава крови

Определяется pH, парциальное давление О2 и СО2, количество бикарбоната в крови пациента.

Исследование гормонального профиля

В крови измеряется уровень гормонов коры надпочечников.

Клинический анализ мочи

Оцениваются физико-химические характеристики мочи: цвет, прозрачность, плотность, кислотность, химический состав. В осадке определяют наличие эпителия, эритроцитов, лейкоцитов, бактерий.

Копрограмма

Используется при диагностике пищевой аллергии.

Общий анализ мокроты

Применяется при диагностике дыхательной аллергии. Исследуются количество,консистенция, цвет, запах, характер (слизь, гной, кровь, серозная жидкость), флора, форменные элементы.

Ревматологические пробы

Объект - кровь. Анализируется уровень ревматологического фактора, фибриногена, С-реактивного белка и антистрептолизина. Метод позволяет установить наличие, локализацию и источник воспаления соединительной ткани.

Вирусологические исследования

Объекты: кровь, кал, мокрота, спинномозговая жидкость. Определяется присутствие вирусов в организме.

Бактериологический анализ мокроты и других выделений (секретов) со слизистых и кожи

Производится посев образца в питательную среду и последующий анализ выращенных колоний. Позволяет выявить и количественно оценить наличие возбудителей инфекционных заболевании.

Цитологическое исследование секрета, мазков или смывов из полости носа, слизистой конъюнктив и др

Метод состоит в исследовании под микроскопом клеток, находящихся во взятом образце, для выявления их морфологических патологий и поражений и их причин.

Специфические методы аллергологического обследования

Данная группа методов диагностики аллергии проводится на пациенте и направлена на выявления агента, вызывающего аллергию.

Кожные пробы (скарификационные)

Производится оценка местной реакции на контакт аллергена с кожей.

Существуют следующие виды кожных проб:

    капельные : препарат аллергена наносится в виде капли на неповреждённую кожу;

Пример проведения капельной диагностики (можно увеличить)

  • аппликационные или patch-тесты: на неповреждённую кожу наносится ткань,пропитанная аллергеном;
  • скарификационные: аллерген вводится через царапины на коже;
  • внутрикожные: препарат аллергена вводится внутрь кожи шприцем.
  • prick тесты : аллерген вводится через укол иглы, смоченной препаратом аллергена.

    • Показания: данные анамнеза, указывающие на аллергическую природу заболевания.

    Противопоказания:

    Причины ложных результатов:

    • Нарушение технологии проведения пробы;
    • Неправильное хранение препаратов аллергенов;
    • Пониженная реактивность кожи;
    • Приём антигистаминных препаратов.

    Положительный результат указывает на сенсибилизацию организма, при совпадении с результатами анамнеза делается вывод об аллергической природе заболевания, при несовпадении проводятся дополнительные тесты.

    При положительной реакции на пробу Манту проводится дифференциальная диагностика поствакцинальной и инфекционной аллергии, то есть определяется, что вызвало местную реакцию - палочка Коха или антитела без инфекции.

    Тест проводится врачом-аллергологом, с применением растворов аллергенов, помещаемых на кожу предплечья. Одновременно наносится до 15 проб.

    Фрагмент сюжета телеканала МИР - проведение прик-тестирования детям

    Элиминационные тесты

    На несколько недель исключается контакт пациента с вероятными аллергенами, что приводит у улучшению общего состояния. При возобновлении воздействия искомого аллергена у больного снова проявляются симптомы аллергии.

    Таким образом можно точно определить вещество, вызывающее аллергическую реакцию. Метод наиболее эффективен при пищевой, лекарственной аллергии и контактных дерматитах.

    Провокационные тесты

    Аллерген наносится на слизистую оболочку органа-мишени, возникает местная аллергическая реакция.

    При диагностике аллергии используются следующие виды провокационных тестов:

    • Назальный (показания: полиноз, ринит): аллерген помещают в ноздрю;
    • Конъюнктивальный: аллерген закапывают под нижнее веко;
    • Подъязычный (пищевая аллергия): аллерген закапывают под язык;
    • Ингаляционный (показания: бронхиальная астма): вдыхается аэрозоль препарата аллергена;
      • Ингаляционный тест с карбахолином : подтверждение диагноза бронхиальной астмы;
      • Ингаляционный тест с холодным воздухом : исследование неспецифической гиперреактивности бронхов;
    • Дополнительные методы аллергологического обследования:
      • Дункан-тест (на холодовую аллергию): помещают на кожу кусок льда на 20 минут;
      • Тепловой тест (на тепловую аллергию): помещают на кожу предплечья бюкс с горячей водой (40 о С) на 10 минут.

    Функциональные методы диагностики аллергии

    Позволяют оценить работу физиологических систем организма посредством инструментального измерения внешних проявлений их работы.

    При диагностике аллергии оценивают работу лёгких и дыхательных путей:

    Проведение пикфлоуметрии при астме (можно увеличить)

    • Пикфлуометрия - измерение пиковой скорости выдоха;
    • Спирометрия и спирография - измеряются скоростные и объёмные характеристики дыхания;
    • Пневмотахометрия - измерение скорости воздуха при форсированном вдохе и выдохе.

    Инструментальные методы обследования

    Арсенал инструментальных методов диагностики аллергии включает в себя:

    • Переднюю риноскопию: диагностика поражений слизистой оболочке носа.
    • Переднюю риноманометрию: измеряет сужение просветов носовых ходов вследствие назального аллерготеста.
    • Эндоскопические исследования: осмотр внутренних органов посредством эндоскопа.

    Кроме вышеперечисленных традиционных, существуют альтернативные методы диагностики аллергии.

    Альтернативные методы диагностики аллергических заболеваний

    Если аллергическое заболевание проявляется нехарактерными симптомами, или затруднена диагностика традиционными способами, прибегают к альтернативным методам диагностики аллергии.

    Лейкоцитотоксический тест

    Определяется количество лейкоцитов, несущих специфический антиген. Наличие антигена определяется по изменению внешнего вида лейкоцита при его реакции с подозреваемым аллергеном.

    Aллергологический тест на выявление IgG в ИФА

    Применяется при выявлении вызывающего аллергию агента и диагностике пищевой непереносимости.

    Так выглядит проведение вегето-резонансного тестирования (можно увеличить)

    VEGA-тестирование (электродермальное тестирование) метод Фоля (Voll)

    Исследование электромагнитной проводимости в организме. Пониженная проводимость указывает на аллергический процесс.

    Анализ волос и тестирование аллергии

    Аурикулокардиальный рефлекс

    Оценивается изменение пульса и кровенаполнения при контакте с аллергеном.

    Для безошибочной постановки диагноза аллерголог при обследовании использует поочерёдно несколько из перечисленных методов диагностики аллергии.

    Программа «Алло, доктор!». Современные методы молекулярной диагностики аллергии

    Диагностика аллергии методом кожного тестирования

    Прежде чем начать лечение заболевания аллергологического характера, проводится диагностика аллергии, направленная на точное установление аллергена, вызывающего негативную реакцию. Как правило, анализ на выявление аллергена проводится путем кожных проб, специальных (провокационных) тестов, а также методом иммунологических лабораторных исследований. Здесь вы можете ознакомиться с подробным обзором всех вышеперечисленных методов диагностики аллергических заболеваний и особенностями их проведения.

    Диагностика аллергических заболеваний: прямые и косвенные признаки

    Первый и крайне важный этап диагностики аллергических заболеваний - правильно собранная история болезни. Данные, которые пациент сообщает врачу во время первого приема, позволяют направить дальнейшее аллергологическое обследование в нужном направлении.

    Существуют прямые и косвенные признаки, указывающие на чувствительность к аллергенам. Например, прямой признак бытовой аллергии - появление клинических признаков заболевания во время уборки помещения, во время игры с мягкими игрушками, при посещении цирка или зоопарка и так далее. Косвенные признаки бытовой аллергии - частые обострения заболевания дома, проявление симптомов чаще ночью в постели, а не на улице при прогулке.

    К прямым признакам пыльцевой аллергии относится появление заболевания (или усиление признаков заболевания) при контакте с цветущими растениями, использовании парфюмерии с цветочной пыльцой, применении средств фитотерапии. Косвенно на пыльцевую аллергию могут указывать обострения в весенне-летне-осенний период, появление реакции при употреблении в пищу меда, орехов, яблок, груш, слив.

    Структура аллергенов (при IGE-зависимых аллергических реакциях) выглядит следующим образом.

    Выработку IgE могут вызвать аллергены белковой природы или комплекс белка с углеводом. Полисахариды не способны сами вызывать стимуляцию образования IgE.

    По молекулярной массе и иммуногенности антигены делятся на две группы: полные антигены и гаптены.

    К полным антигенам относятся антигены пыльцы, эпидермиса, сыворотки животных и другие. Они способны самостоятельно вызвать синтез IgE антител. Основу полного антигена составляет полипептидная цепь.

    Неполные антигены, или гаптены, - низкомолекулярные вещества, сами по себе не являются аллергенами. Попадая в организм, гаптены образуют комплекс с тканевыми или сывороточными белками, и уже этот комплекс выступает в роли аллергена.

    Различия между полными антигенами и гаптенами имеют принципиальное значение в диагностике аллергических заболеваний. Полные антигены можно идентифицировать с помощью диагностических препаратов при кожном тестировании. Однако определить гаптен и изготовить на его основе диагностический препарат практически невозможно (исключение составляют только пенициллины).

    Выявлению аллергенов способствуют кожные пробы, провокационные тесты, лабораторные анализы.

    Как выявить аллерген: лабораторный тест на аллергическую реакцию

    Лабораторные иммунологические тесты. Наиболее отработанный аллергический тест, проводимый в лабораторных условиях, - это определение аллерген-специфических IgE антител в сыворотке крови. Лабораторные методы могут лишь установить наличие какого-либо звена аллергического процесса, но не отражают картину в целом. Тест на аллергическую реакцию - это результат одновременного участия всех составляющих сложного механизма иммунологического процесса. Он принципиально не может быть получен в лабораторных условиях, поэтому тесты используются как вспомогательный, хотя и важный, инструмент диагностики и не могут заменить проведение испытаний на самом больном.

    Как проводят тест на аллергию: кожные пробы

    Кожные пробы. В диагностике большинства аллергических заболеваний используется постановка кожных диагностических проб.

    Кожные пробы на аллергены малоинформативны при обширном поражении кожи. Для диагностики лекарственной аллергии кожное тестирование используется крайне редко, поскольку обычно аллергию вызывает не сам препарат, а его метаболиты, определить которые невозможно. Из лекарств кожные пробы проводятся только с белковыми аллергенами - например, с инсулином, сыворотками и пенициллинами.

    Помимо местной реакции при проведении кожных проб могут возникнуть и общие реакции, как правило, через 10-180 минут после тестирования. Наличие общих реакций служит надежным доказательством чувствительности организма к аллергену.

    Перед тем как выявить аллерген, медики обязательно учитывают особенности проведения кожных проб:

    • Кожное тестирование проводят только в период ремиссии заболевания.
    • Кожное тестирование целесообразно выполнять не ранее чем через 3-4 недели после системной аллергической реакции.
    • Все виды кожных проб могут дать системную реакцию в виде анафилактического шока или обострения со стороны шокового органа.
    • Перед кожным тестированием на аллергию следует заранее отменить прием антигистаминных препаратов, причем срок отмены во многом зависит от вида препарата.

    Среди кожных проб выделяют аппликационные пробы, тест уколом (прик-тест), скарификационные и внутрикожные пробы.

    Проведение скарификационных кожных проб

    Скарификационные кожные пробы применяют при подозрении на сенисбилизацию к пыли (домашние клещи), пыльце, эпидермальным аллергенам и пище. Из всех видов кожных проб именно этот вид диагностики аллергии наиболее распространен в России.

    Как проводят такие тесты на аллергию в амбулаторных условиях? При проведении скарификационных проб на кожу предплечья капают водные растворы различных аллергенов (пылевых, пыльцевых, пищевых) на некотором расстоянии друг от друга. В местах нанесения капель слегка повреждают кожу, не затрагивая кровеносных сосудов. Через 10 минут капли удаляют, а еще через 10 минут проверяют, не появились ли эритема (сильное покраснение) и волдырь.

    Такие тесты довольно чувствительны, а техника их проведения менее стандартизована, чем проба уколом. Поэтому предпочтительнее проведение прик-теста.

    Прик-тест, конъюнктивальный и назальный тесты для диагностики аллергии

    Прик-тест - это метод диагностики аллергий путем прокола кожи через каплю раствора аллергена. Прокол должен быть достаточным по глубине, но не до крови. Оценку реакции проводят через 20 минут. Прик-тест редко дает ложноположительные реакции.

    Конъюнктивальный тест - это проба на аллергию путем закапывания разведенного аллергена в глазную щель. Она проводится при подозрении на аллергический конъюнктивит. Проводится крайне редко в связи с непредсказуемой возможной тяжелой реакцией со стороны глаз.

    Назальный провокационный тест - это аллергическое тестирование, которое проводится при подозрении на аллергический ринит. В носовой ход последовательно, через каждые 15-20 минут, закапывают несколько капель аллергена в возрастающих концентрациях (от 1/100000 до 1/10).

    Аппликационное аллергическое тестирование

    Аппликационные кожные тесты (патч-тесты) – это тест для диагностики аллергии, который используется при подозрении на контактный аллергический дерматит и фотоаллергические реакции. В последние годы обсуждается возможность их использования у больных атопическим дерматитом. Тесты проводятся на незатронутых повреждением участках кожи. Тест-аллергенами чаще всего служат различные химические вещества, в том числе и лекарства. Их применяют в чистом виде или в растворах в концентрациях, не вызывающих раздражения кожи у здоровых людей.

    Для постановки и оценки кожных тестов требуется 3-4 визита больного к врачу. В первый раз осуществляется нанесение аллергена на кожу. Обычно раствором аллергена смачивают кусочек марли и закрепляют его на коже предплечья, живота или спины. Результаты оценивают через 20 минут, 5-6 часов и 1-2 суток. Если на месте аппликации аллергена возникло выраженное жжение и зуд, пациент должен обратиться к врачу. В этом случае лоскут снимают раньше. Реакцию оценивают, пользуясь специальной шкалой.

    Анализ на выявление аллергена проведением внутрикожных и провокационных проб

    Внутрикожные пробы (подкожные инъекции аллергена) почти не используются в диагностике. Проведение внутрикожных проб проводится очень редко из-за высокого риска системной реакции.

    Провокационные пробы – это тестирование на аллергию методом выявления сенсибилизации (чувствительности), основанное на непосредственном введении аллергена в орган-мишень. Наиболее достоверный метод аллергологической диагностики, однако, и наиболее опасный. Предсказать реакцию больного на провокацию невозможно, поэтому требуется наличие строгих показаний для ее проведения. Так же как и кожные пробы, с аллергенами, провокационные пробы могут проводиться только в период полной ремиссии заболевания. По способу введения аллергена различают назальные, конъюнктивальные и ингаляционные провокационные пробы. У больных с пищевой аллергией подозреваемый пищевой продукт дается больному через рот.

    Основное преимущество провокационных проб перед кожными, заключается в большей достоверности результатов. Недостатки же - в повышенном риске тяжелых аллергических реакций, сложность с количественной оценкой результатов. Кроме того, в один день можно провести пробу только с одним аллергеном.

    Какие методы наиболее эффективны в диагностике причин аллергии

    Когда Вы обнаруживаете у себя или своих близких расстройства здоровья, которые могут быть симптомами аллергии, необходимо обратиться к терапевту или дерматологу (в случае, когда симптомами являются кожные реакции).

    Для лечения у специалиста аллерголога требуется направление, которое может быть выдано семейным врачом или дерматологом.

    Диагностические симптомы аллергии

    В первую очередь, самое главное, это интервью – он включает в себя определение семейной предрасположенности к образованию аллергических заболеваний и склонности к аллергическим реакциям в прошлом.

    Врач спрашивает о симптомах заболеваниях: сезонные или круглогодичные риниты пазух носа, конъюнктивит, крапивница, одышка, понос, запор.

    Тест на аллергию методом Прик-тест

    National Institute of Allergy and Infectious Diseases, public domain

    Предметное исследование пациента, указывающее на возникновение аллергии , является показанием к выполнению диагностических обследований, выявлению аллергена.

    Диагностика аллергии позволяет начать эффективное лечения и снижает тягость симптомов аллергии, поэтому не стоит пренебрегать аллергической реакцией и рассчитывать на то, что болезни пройдут сами собой.

    Диагностика аллергических заболеваний

    Что делать, если вы заметили проявления аллергии у вашего ребенка? Это может быть насморк, чиханье, сыпь и зуд кожи, отеки век и губ в ответ на контакт с пыльцой растений, животными и насекомыми, продуктами питания или домашней пылью. Склонные к аллергии дети обычно сенсибилизированы к множеству аллергенов. Знать к каким именно родителям нужно для того, чтобы по возможности удалить их из среды обитания ребенка. Прекращение контакта с аллергеном – один из основных этапов лечения любого аллергического заболевания. Сегодня мы поговорим о методиках, применяемых для их диагностики.
    Тестирование с диагностическими аллергенами проводит доктор-аллерголог в условиях аллергологического кабинета. Перед этим с родителями и ребенком ведется беседа, в ходе которой собирается подробная информация о течении заболевания. Будьте готовы ответить на вопросы доктора о первых симптомах, длительности, предполагаемых провоцирующих факторах, применяемых ранее лекарствах, других заболеваниях ребенка.

    Далее проводится осмотр и назначается первичное обследование. Нужно сдать кровь и мочу для общего анализа, пройти флюорографию и ЭКГ. Будьте готовы к тому, что потребуется консультация дерматолога, оториноларинголога, невропатолога. Для диагностики аллергии у детей применяют кожные пробы и провокационные аллергические тесты. Существуют противопоказания к их проведению:

    Острая фаза аллергического или любого другого заболевания;
    острая инфекция любой локализации;
    проведение глюкокортикостероидной или антигистаминной терапии;
    декомпенсированное состояние при болезнях внутренних органов.

    Когда же лучше выполнять пробы с аллергенами? Подозреваемую сенсибилизацию к пыльце диагностируют зимой за несколько месяцев до начала массового цветения, к бытовым аллергенам – летом, к аллергенам животных – через несколько месяцев после того, как устранен с ними контакт. То есть специфическая диагностика проводится во время наименьших проявлений аллергии, а лучше при полном их отсутствии.  

    Скарификационные пробы:

    Методика заключается в оценке реактивности кожи при контакте с различными антигенами. Для пробы используют диагностические аллергены в малом разведении (10000 PNU). Кожа волярной поверхности предплечья обрабатывается раствором антисептика. От лучезапястного сустава отступают 5 см и делают стерильным скарификатором первую насечку. На нее наносят 0,01% раствор гистамина, чтобы оценить нормальный ответ кожных покровов. Отступив 5 см, новым скарификатором делают еще насечку и наносят контрольную жидкость, чтобы зафиксировать для сравнения отрицательную реакцию. Далее на расстоянии 5 см друг от друга наносят капли аллергенов. В каждой капле своим скарификатором делают 2 параллельные насечки длиной до 5 мм. Результат оценивают спустя 20 мин.
    Реакцию кожи на экзогенный антиген в виде волдыря над зоной гиперемии считают положительной и характеризуют по шкале от + до ++++. Наличие волдыря больше 5 мм и псевдоподий говорит о резкоположительной реакции (+++ и ++++).

    Прик-тест (проба уколом):

    Более современная и чувствительная методика. На кожу предплечья с внутренней стороны наносятся капли аллергенов, растворителя и 0,1 % гистамина на расстоянии 2-4 см друг от друга. Капли прокалывают иглой из стандартного одноразового набора. Время оценки результата короче: на гистамин – через 10 мин, пыльцевые аллергены – 15 мин. Шкала оценки подобна таковой для поверхностных проб.

    Внутрикожная проба:

    При сомнительных результатах поверхностных кожных проб у детей с предполагаемой сенсибилизацией к определенным антигенам их вводят внутрикожно с помощью инсулиновых шприцов.  
    Простерилизовав кожу волярной поверхности предплечья, поочередно вводят 0, 02 мл жидкости (сначала контрольной, затем испытуемых аллергенов). Разведение препарата аллерголог подбирает индивидуально: начиная с 1 PNU и заканчивая 1000 PNU. Регистрацию результата пробы проводят через 20 мин с помощью шкалы плюсов. О резкоположительном ответе говорит волдырь с псевдоподиями размером более 15 мм на фоне покраснения кожи.

    Провокационные тесты:

    Бывают дети, у которых из-за сильной реакции капилляров кожи на механическое повреждение скарификационная проба дает ложноположительный результат. В таких случаях аллерголог может порекомендовать назальное капельное или ингаляционное введение аллергена. Тестирование должно проводиться лишь в узкоспециализированном стационаре, где при возникновении анафилактической реакции ребенку окажется немедленная помощь.
    Капельный тест показан при рините, вызванном пыльцой растений или домашней пылью. В одну ноздрю сперва закапывают 3 капли жидкости-контроля. Если спустя 15 мин никакой реакции не возникло, капают 3 капли аллергена в разведении, при котором возникла ложноположительная реакция внутрикожного теста (волдырь до 4 мм, что рассасывается медленнее, чем в контроле). Если реакции слизистой носа через 15 мин не последовало, концентрацию увеличивают. Провокационный назальный тест положителен при появлении чихания, чувства заложенности носа, слизистых выделений.

    Лабораторные методики:

    Позволяют определять моноклональные Ig E в период обострения аллергии, при высокой активности аллергического ответа. Широко применяется у детей. С помощью сертифицированных диагностиков в крови определяют специфические иммуноглобулины к предполагаемым антигенам.

    PRIST – метод определяет концентрацию в сыворотке неспецифического Ig E с помощью тест-полоски, пропитанной радиоиммуносорбентом.  

    RAST – методика основана на связывании специфического Ig E сыворотки с аллергеном, зафиксированном на тест-пластинке. Общий Ig E отмывают. К содержимому добавляют меченые I125   антитела к Ig Е. Образовавшееся радиоактивное соединение фиксирует сцинтилляционный счетчик.

    ИФА – сыворотку крови ребенка наносят на специальную поверхность, на которой адсорбированы антигены (полистирольный планшет или микроцеллюлозные диски). Чтобы определить концентрацию специфических Ig E добавляют к ним меченые антитела и соответствующие реагенты, которые воспроизводят реакцию в цвете. Ее интенсивность оценивается фотометрически.
    Реакция выявления специфических Ig E – современная аллергодиагностика, которой должно отдаваться предпочтение. Однако в некоторых клинических случаях не потеряли своей актуальности тесты для диагностики антителзависимых реакций, реакций замедленного типа.